軟件：OriginPro9.1

素材：PAM熒光儀導出的PAR和ETR數(shù)據(jù)。

操作步驟

1，正確安裝Origin軟件，打開軟件

2，打開正確操作PAM測量得到的快速光曲線數(shù)據(jù)文件

3，將PAR和ETR的數(shù)據(jù)復制到Origin軟件，并編輯橫坐標和縱坐標注釋及單位

4，選中數(shù)據(jù)，生成散點圖，注意：一定一定一定要先選中數(shù)據(jù)，才能生成圖哦！

5，可以根據(jù)需求調(diào)整散點圖橫縱坐標起始值，及最大值，間隔大小以及散點的樣式，形狀或顏色。

6，開始擬合：激活Graph，選中散點圖的數(shù)據(jù)點。

注意：一定一定一定要先選中散點圖中的點，再點擊工具欄！

點擊軟件上方的 Analysis→Fitting→NonLinearCurve Fit→Open Dialog

7，創(chuàng)建擬合方程

對話框中，Category選項選擇“UserDefined”（用戶自定義），再點擊箭頭所指按鈕，打開創(chuàng)建新方程的對話框。對話框中：Function Name一欄可對方程進行命名（僅限英文），此次命名為“LightCurveFit”；FunctionType一欄選擇第二個“Equations”，然后點擊next進行下一步。

8，編輯擬合方程

進入?yún)?shù)設置，第一行和第二行為自變量x和因變量y，第三行為你自己需要設置的方程參數(shù)，以一元二次方程為例，設置參數(shù)a,b,c（字母和標點符號必須是英文輸入法），然后點擊next進行下一步。

9，設置方程式

進入方程輸入，如圖，在紅線框出的地方輸入一元二次方程。（字母和符號必須是英文輸入法）。

y=x/(a*x^2+b*x+c)

到此處基本設置已完畢，一直點擊next即可，最后點擊finish！

10，開始擬合

點擊并切換至Parameters窗口，點擊Simplex擬合，直至Parameters內(nèi)參數(shù)不變，點擊Fit完成擬合。

點擊完Fit，可能會出現(xiàn)一個對話框，詢問是否切換到CurveFit Report Sheet。

11，查看擬合結(jié)果，修改擬合曲線注釋文本等

強烈建議：

分析結(jié)束后請盡快通過File→Save Project保存工作流程。

擬合曲線可以通過File→Export Graph導出。

12，計算快速光曲線參數(shù)

測量光響應曲線時<Light Curve>程序連續(xù)照射幾個強度逐漸升高的光化光，一般情況下每個梯度的光化光持續(xù)時間太短而不足以使光合作用達到穩(wěn)態(tài)。因此，此時的光響應曲線被稱為快速光曲線（RLC）。和傳統(tǒng)的光響應曲線不同，快速光曲線反映了當前狀態(tài)下光合作用的信息。通過對快速光曲線進行擬合，可以得到以下幾個主要參數(shù)：

? α，單位：electrons/photons，快速光曲線的初始斜率，反映了光能利用效率。

? ETRm，單位：μmol· m-2 · s-1，最大電子傳遞速率。

? Ek，單位：μmol· m-2 · s-1，最小飽和光強（半飽和光強），反映了樣品對強光的耐受能力。

PamWin-3采用Eilers and Peeters（1988）的公式對快速光曲線進行擬合，擬合公式如下：

各個參數(shù)的計算公式分別是：

以上Origin9.1進行PAM熒光儀快速光曲線擬合操作指南請參考！如有其他技術(shù)問題，請聯(lián)系上海澤泉科技股份有限公司！