流式細(xì)胞儀能否辨別到種是一些藻類檢測工作者最關(guān)心的問題之一。而成像質(zhì)量的提高，可幫助我們觀測到鑒定相關(guān)的細(xì)節(jié)和高清晰度的內(nèi)部小結(jié)構(gòu)。

理論上，放大倍數(shù)越高，成像質(zhì)量越好，如40X或60X。 然而缺點是倍率越高景深越小，因此一些成像倍率高的設(shè)備通常采用非常窄的流動池，也就意味著你只能分析非常小的顆粒，因此，野外樣品（如自然海水等）需要將所有大粒徑的顆粒過濾掉。CytoBuoy經(jīng)過不懈努力，更新光學(xué)元件，實現(xiàn)在16X放大倍數(shù)下使用非常大的流動池呈現(xiàn)高質(zhì)量的圖像。新系統(tǒng)可設(shè)置僅在顆粒穿過相機焦平面時進(jìn)行拍攝，這意味著不再有模糊照片形成的照片流阻礙。

關(guān)于CytoSense當(dāng)前使用的超大流通池和放大倍數(shù)，CytoBuoy 公司CEO George B.J. Dubelaar 先生給了比較詳細(xì)的介紹：

樣品的過濾預(yù)處理

為防止流式細(xì)胞儀管路堵塞，大部分流式細(xì)胞儀都會標(biāo)明客戶在分析樣品之前需要對樣品進(jìn)行過濾預(yù)處理。而我們使用的濾膜過濾孔徑與實際通過的顆粒粒徑并非完全一致。實際上，如果你使用過濾孔徑為Xμm 的濾篩過濾樣品，一般來說自由通過的顆粒粒徑只有X的1/3。粒徑大于1/3Xμm 的顆粒會隨著過濾時間的增長越來越難自由通過濾篩。因此，通過的顆粒數(shù)量偏低且對濃度的評估不準(zhǔn)確，因為接近Xμm大小的顆粒幾乎沒有通過。所以，使用非常粗略的方法可以推測，在儀器入口前對任何顆粒使用Xμm孔徑的篩網(wǎng)進(jìn)行過濾，所得最大顆粒粒度的正確測定值僅為X的一半。假如設(shè)備要求樣品分析前必須經(jīng)過70μm 網(wǎng)篩過濾，這可能意味著其最佳分析粒徑為30-40μm。對于CytoSense, 我們建議采用1mm甚或1.2mm濾膜過濾以防堵塞。

圖像清晰度的關(guān)鍵還取決于光學(xué)透鏡的設(shè)計

我們通常認(rèn)為成像質(zhì)量依賴于透鏡的放大倍數(shù)。有些成像流式細(xì)胞儀只有在40X和60X放大倍率下才能獲得好的照片，這種倍率下景深極窄和畫框尺寸非常小。對與野外樣品就會存在粒徑限制——最大照片畫框尺寸的20X倍率也只能分析120μm。CytoSense 具有16X 放大倍數(shù)，然而我們最新透鏡（專門為我們流式細(xì)胞儀定制設(shè)計）的光學(xué)設(shè)計非常優(yōu)秀，而且事實上聚焦的圖像的清晰度比我們的其他同類產(chǎn)品的20X放大倍率還要好。更重要的是，我們可以對所有大到直徑500um的顆粒進(jìn)行高質(zhì)量成像。

分享一組測試照片，感受一下新版CytoSense實際的成像效果。結(jié)合散點圖，Silico-imaging詳細(xì)記錄細(xì)胞的全部光學(xué)信息，逐個掃描，不放過自然水體中的稀有藻種。

空星藻（Coelastrum.）
小環(huán)藻（Cyclotella sp.）
小環(huán)藻（Cyclotella sp.）
小環(huán)藻（Cyclotella sp.）
直鏈藻（Melosira）
顆粒直鏈藻極狹變種（Melosira granulata var angustissima）
角甲藻（Ceratium）
魚磷藻（Mallomonas）
根管藻（Rhizosolenia）
等片藻Diatoma
嚙蝕隱藻Cryptomons erosa
浮游動物